ATCC細(xì)胞系液體培養(yǎng)基的保存要冷藏，因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變，溶液往往變堿，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。
　　ATCC細(xì)胞系的細(xì)胞培養(yǎng)小技巧:
　　1. 買(mǎi)細(xì)胞要去靠譜的地方買(mǎi)，比如 ATCC 或者斯信生物。一般上面會(huì)有針對(duì)細(xì)胞的介紹，這樣培養(yǎng)之前可以了解細(xì)胞正常生長(zhǎng)的狀態(tài)圖、傳代、培養(yǎng)基的類(lèi)型等。
　　2. 不管是買(mǎi)的細(xì)胞，還是別人惠贈(zèng)的細(xì)胞，剛拿到手趕緊的做兩件事：檢測(cè)是否有支原體污染;迅速擴(kuò)增凍存，凍存細(xì)胞復(fù)蘇后第二天zui 好更換一次培養(yǎng)基。
　　3. 發(fā)現(xiàn)細(xì)胞有污染迅速處理掉，特別是當(dāng)你養(yǎng)了很多種細(xì)胞時(shí)。污染、污染很容易發(fā)現(xiàn)，支原體污染的話(huà)，細(xì)胞會(huì)長(zhǎng)的慢，可以買(mǎi)個(gè)支原體檢測(cè)的試劑盒定期檢測(cè)一下。
　　4. 不同細(xì)胞生長(zhǎng)周期不同。有的生長(zhǎng)很快，比如說(shuō) MDA-MB-231，傳代的時(shí)候取離心懸液的十分之一就已經(jīng)足夠了。有的又是特別慢，比如 BT474，傳代是一分二，復(fù)蘇起始的時(shí)候兩周多才能長(zhǎng)滿(mǎn)。這就需要要在培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中多多摸索。
　　5. 對(duì)于嬌弱的細(xì)胞，就得細(xì)心呵護(hù)。胰酶消化不能過(guò)久，吹得時(shí)候要輕柔，離心時(shí)候也要注意轉(zhuǎn)速和時(shí)間。每天都要去看一下細(xì)胞，肉眼觀(guān)察培養(yǎng)基狀況、顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況。記住，是每天。
　　ATCC細(xì)胞系注意事項(xiàng):
　　1）操作前要洗手，進(jìn)入超凈臺(tái)后手要用75%酒精或0.2%新潔爾滅擦試。試劑等瓶口也要擦試。
　　2）點(diǎn)燃酒精燈，操作在火焰附近進(jìn)行，耐熱物品要經(jīng)常在火焰上燒灼，金屬器械燒灼時(shí)間不能太長(zhǎng)，以免退火，并冷卻后才能夾取組織，吸取過(guò)營(yíng)養(yǎng)液的用具不能再燒灼，以免燒焦形成碳膜。
　　3）操作動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不能太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。
　　4）不能用手觸已消毒器皿的工作部分，工作臺(tái)面上用品要布局合理。
　　5）瓶子開(kāi)口后要盡量保持45℃斜位。
　　6）吸溶液的吸管等不能混用。