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購買細胞株前需要了解的相關(guān)技術(shù)知識

原載自:tljr.com.cn[技術(shù)資料頻道]  2021-06-21  瀏覽次數(shù):1157

   穩(wěn)定細胞株廣泛用于許多重要的應(yīng)用,包括生物制品(如重組蛋白和單克隆抗體)生產(chǎn)、藥物篩選和基因功能研究。開發(fā)穩(wěn)定細胞株的過程通常始于將所需的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至選定的宿主細胞,一般是 CHO 或 HEK 293 細胞。轉(zhuǎn)染后,研究人員隨后篩選和定量分析高表達的細胞克隆。
  細胞培養(yǎng)是細胞株開發(fā)的基礎(chǔ),無論是細胞轉(zhuǎn)染,培養(yǎng)基優(yōu)化,還是抗體表達檢測等實驗都在細胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)上完成。細胞培養(yǎng)是一個長流程,精細,耗費時間和人力的流程,定期的細胞計數(shù)接種,細胞換液,細胞轉(zhuǎn)染等繁瑣的實驗對工作人員的挑戰(zhàn)極大,且在高通量的人工操作中易帶入污染而導(dǎo)致細胞培養(yǎng)及篩選的失敗。高通量、標準化、自動化的細胞培養(yǎng)能幫助我們在獲得更準確的結(jié)果的同時加速細胞株開發(fā)進度。
  一旦檢測到這些高產(chǎn)細胞株,便進一步對這些細胞和其產(chǎn)生的蛋白質(zhì)進行驗證。傳統(tǒng)上用于細胞株開發(fā)的手動篩選方法耗時且需要大量勞力,因此對于此類工作,存在對高通量、自動化解決方案的巨大需求。
  細胞培養(yǎng)方法多樣講解:
  透射光分割(分析)算法提高了不同細胞類型計數(shù)的準確性,通常用于對未染色的活細胞或固定細胞進行成像。另外還有使用熒光方法檢測細胞核或細胞體的標準細胞計數(shù)方法。圖像細胞計數(shù)法是一種將低倍率顯微鏡與成像和分析工具相結(jié)合的細胞計數(shù)技術(shù)。圖像細胞計數(shù)法有助于在單次檢測中提供關(guān)于大量細胞的細胞特性信息。
  圖像細胞計數(shù)法可用于無標記或熒光標記細胞,可對一個細胞群多次執(zhí)行,以隨時提供關(guān)于細胞動力學(xué)的信息。
  活細胞成像是通過顯微觀察研究活細胞的細胞結(jié)構(gòu)和功能。它可以實時顯示和定量細胞的動態(tài)變化過程?;罴毎上癜喾N方向和生物應(yīng)用 — 無論是對活細胞進行長期動力學(xué)檢測,還是進行熒光標記。
  細胞的單克隆源性驗證在確保生物制藥產(chǎn)品的純度和均一性上至關(guān)重要,F(xiàn)DA 的政策和法規(guī)都強制要求生物制藥企業(yè)提供清晰圖片證據(jù)以證明單克隆抗體研發(fā)過程中的單克隆源性。這些要求對我們的單克隆接種及成像設(shè)備提出了更高的要求。細胞株開發(fā)就是發(fā)現(xiàn)源自單個細胞的克隆,其可穩(wěn)定高表達目標治療性蛋白。此過程的第一步是分離活的單細胞。有限稀釋是一種依賴于統(tǒng)計概率的技術(shù),但很耗時。

 

 

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