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新聞動態(tài) / news
中科院細胞所分享細胞的計數(shù)步驟
原載自:tljr.com.cn[行情動態(tài)] 2019-09-13 瀏覽次數(shù):2068
中科院細胞所分享細胞的計數(shù)步驟
當待測細胞懸液中細胞均勻分布時,通過測定一定體積懸液中的細胞的數(shù)目,即可換算出每毫升細胞懸液中細胞的細胞數(shù)目。具體步驟如下:
1.將細胞制成細胞懸液;
2.將蓋玻片放在血細胞計數(shù)板的2個小室上;
3.吸取少許細胞懸液輕輕注入蓋玻片邊緣與計數(shù)板交界處;
4.100倍鏡下,用計數(shù)器計數(shù)每個小室的中央和四角的方格中的細胞;
5.只計數(shù)壓左邊中線和上邊中線的細胞;
6.分別用雙蒸水和75%酒精清洗計數(shù)板、蓋玻片,并擦干。
細胞計數(shù)的幾大要點:
1.進行細胞計數(shù)時,要求懸液中細胞數(shù)目不低于1×107 L-1,如果細胞數(shù)目很少要進行離心再懸浮于少量培養(yǎng)液中;
2.要求細胞懸液中的細胞分散良好,否則影響計數(shù)準確性;
3.取樣計數(shù)前,應充分混勻細胞懸液,尤其時多次取樣計數(shù)時更要注意每次取樣都要混勻,以求計數(shù)準確;
4.數(shù)細胞的原則是只數(shù)完整的細胞,若細胞聚集成團時,只按照1個細胞計算。如果細胞壓在格線上時,則只計上線,不計下線,只計右線,不計左線;
5.操作時,注意蓋片下不能有氣泡,也不能讓懸液流入旁邊槽中,否則要重新計數(shù)。
其中,初學者易犯的錯誤是計數(shù)前未將待測懸液吹打均勻。滴入細胞懸液時蓋玻片下出現(xiàn)氣泡。滴入懸液時的量太多,至使細胞懸液流入旁邊的槽中。
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