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細(xì)胞株的傳代事項(xiàng)說明看仔細(xì)!

原載自:tljr.com.cn[行情動(dòng)態(tài)]  2020-01-16  瀏覽次數(shù):1275

   細(xì)胞株即為從組織中分離的原代培養(yǎng)物經(jīng)*傳代培養(yǎng)成功后即成細(xì)胞系;通過選擇和克隆形成以原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)物。
  細(xì)胞株的傳代分析:
  消化細(xì)胞制備細(xì)胞懸液,根據(jù)稀釋比例和試驗(yàn)需要,將等比例的細(xì)胞懸液分別加入新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中,并加入適量的細(xì)胞培養(yǎng)基進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng),并記錄相關(guān)的記錄中。
  備注:細(xì)胞培養(yǎng)基中的血清比例可以根據(jù)細(xì)胞生長狀態(tài)在5%-20%范圍進(jìn)行調(diào)整。傳代的比例(稀釋比例)建議在1/3-1/10之間。
  1.直接傳代法
  ①待懸浮細(xì)胞長滿至80%-90%(細(xì)胞懸液變黃),即可傳代;
 ?、谟梦芪鼦壖?xì)胞懸液1/2-1/3;
 ?、奂尤脒m量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
  2.離心傳代法
  ①將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi);
  ②150g離心5min,棄去上層清液;
 ?、凼褂眯迈r的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;
 ?、芪芪∵m量細(xì)胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
  注意事項(xiàng):
  1.嚴(yán)格的無菌操作。
  2.細(xì)胞消化的時(shí)間受消化液的種類、配制時(shí)間、加入培養(yǎng)瓶中的量等諸多因素的影響,消化過程中應(yīng)該注意培養(yǎng)細(xì)胞形態(tài)的變化,一旦胞質(zhì)回縮,連接變松散,或有成片浮起的跡象就要立即終止消化。
  3.傳代細(xì)胞所有的操作盡量靠近酒精燈火焰。每次只進(jìn)行一種細(xì)胞的操作,每種細(xì)胞使用一套器材。避免交叉感染。
  4.傳代細(xì)胞瓶口每次打開或者關(guān)閉都需要在酒精燈上消毒。

 

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