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ATCC細(xì)胞培養(yǎng)所用耗材相關(guān)問題解析
原載自:tljr.com.cn[行情動(dòng)態(tài)] 2023-03-09 瀏覽次數(shù):568
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)培養(yǎng)基的選擇依細(xì)胞種類而定。如果是從別的實(shí)驗(yàn)室借來的細(xì)胞,初階段一定要保持細(xì)胞原有的培養(yǎng)條件;特殊種類的細(xì)胞如內(nèi)皮細(xì)胞,可以借鑒網(wǎng)上培養(yǎng)成功的條件,添加一些特定成分。細(xì)胞適合的培養(yǎng)基pH值是7.2-7.4,偏高或偏低都不好,但相對于堿性條件而言,細(xì)胞更耐酸。原代細(xì)胞對pH值的變化很敏感,而永生性細(xì)胞相對來說忍受力更強(qiáng)一些。
ATCC細(xì)胞培養(yǎng)所用耗材相關(guān)問題解答:
1.培養(yǎng)懸浮細(xì)胞該使用哪種表面耗材?
懸浮細(xì)胞沒有細(xì)胞貼壁的需求,一般使用未處理表面培養(yǎng)耗材即可。TC處理表面也可培養(yǎng)懸浮細(xì)胞,但根據(jù)細(xì)胞的狀態(tài)和種類,可能會(huì)有一些細(xì)胞出現(xiàn)貼壁的現(xiàn)象。
2.若自己包被細(xì)胞外基質(zhì)該選哪種表面耗材?
可以選擇未處理表面的培養(yǎng)器皿自行包被細(xì)胞外基質(zhì)。當(dāng)然這種情況下TC處理表面的器皿也是可以使用的。
3.密閉蓋的細(xì)胞培養(yǎng)瓶如何使用?與帶濾膜的蓋子使用上有什么區(qū)別?
密封蓋的細(xì)胞培養(yǎng)瓶提供密閉的細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境,若需要與培養(yǎng)箱中空氣聯(lián)通,需要在培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱后,將瓶蓋略微擰松,以允許空氣進(jìn)入。同樣在取出時(shí),需要先將瓶蓋擰緊再取出。帶濾膜的蓋子本身具有透氣的功能,濾膜可防止微生物污染,因此在使用時(shí)直接將瓶蓋擰緊放入培養(yǎng)箱即可,但需要注意不能將瓶蓋上的濾膜打濕,濕的濾膜無法確保氣體通過。
4.培養(yǎng)皿使用后發(fā)現(xiàn)細(xì)胞不貼壁是何原因?
導(dǎo)致細(xì)胞不貼壁的因素有很多,培養(yǎng)基成分及pH值,培養(yǎng)環(huán)境,消化操作,細(xì)胞類型,細(xì)胞代次等。若長期使用同一貨號(hào)產(chǎn)品培養(yǎng)同一細(xì)胞株而出現(xiàn)了細(xì)胞之前貼壁正常,現(xiàn)在不貼壁的情況,建議及時(shí)記錄兩種情況所用產(chǎn)品的批次號(hào),并且進(jìn)行重復(fù)的平行實(shí)驗(yàn),即使用同一來源的細(xì)胞分別鋪在這兩個(gè)批次的耗材上進(jìn)行培養(yǎng),培養(yǎng)在同一培養(yǎng)箱中來確定細(xì)胞不貼壁的主要原因。