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細胞工程 > 穩(wěn)定細胞株構建 > 穩(wěn)定細胞株構建服務

穩(wěn)定細胞株構建服務
名稱 穩(wěn)定細胞株構建服務
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特點 構建穩(wěn)定細胞系的基本原理是將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。Z常用的真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩(wěn)定表達目的蛋白,或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。
  • 詳細內容

服務背景

穩(wěn)定細胞株構建是指將外源DNA克隆到具有某種抗性的載體上,載體被轉染到宿主細胞并整合到宿主染色體中,用載體中所含的抗性標志進行篩選。真核表達載體的抗性篩選標志物有新霉素(neomycin)、潮霉素(hygromycin)和嘌呤霉素(puromycin),常用G418來代替新霉素進行選擇性篩選,篩選得到可穩(wěn)定表達目的蛋白,或者穩(wěn)定表達沉默特定基因的細胞株。

穩(wěn)定細胞株的構建周期長、難度大,每一步都很關鍵,尤其是細胞轉染,常用物理方法(電轉)、化學方法(脂質體等)、生物方法(病毒),根據不同的實驗條件,選擇合適方法,來達到實驗目的。

服務原理

穩(wěn)定細胞株構建的基本原理是用基因導入工具或基因編輯工具,改造原始細胞基因組,使改造后的細胞具有某些特定表型,并經過抗性篩選或其他篩選方法,使其表型能長期傳代穩(wěn)轉。

服務優(yōu)勢

·科佰擁有龐大的母細胞庫和數據庫資源,熟悉細胞特性。

·多樣而靈活的基因導入和編輯工具。

·豐富的構建經驗和成功案例。

· 快速高效的開發(fā)流程。

·嚴格的檢測和質控。

·銜接穩(wěn)轉細胞株應用方法開發(fā)與優(yōu)化。

·提供全流程和完整系統(tǒng)的開發(fā)。

平臺介紹

科佰生物在穩(wěn)定細胞株構建上擁有豐富的經驗,熟悉每一步操作,尤其對關鍵步驟有獨到的經驗,成功為眾多科研客戶構建目的細胞株(過表達、可誘導過表達、沉默、可誘導沉默、報告基因等等)。

服務流程

質粒類方法工作流程

病毒方法工作流程.png

病毒類方法工作流程


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