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      布魯頓激酶（BTK）是 BCR 通路的關鍵酶之一。BCR 信號啟動后，BTK 磷酸 化并激活磷脂酶 Cγ2 （PLCγ2），進而激活 NF-κB。BTK 突變最初是在 x 連鎖無丙種球蛋 白血癥（XLA）患者中發(fā)現(xiàn)的。BTK 在 CLL、MCL、DLBCL 和其他類型淋巴瘤中的進一 步研究使其成為治療癌癥的有利靶點。此外，BTK 已被證明在 toll 樣受體介導的感染因子 識別和 Fc 受體信號傳導中起作用。其中，F(xiàn)c 受體信號在 BTK 信號傳導中尤為重要。肥大 細胞、嗜堿性細胞、單核細胞、巨噬細胞等免疫細胞在炎癥和過敏反應中發(fā)揮重要作用， 這些炎癥和過敏反應是由高親和力 IgE 受體（FcεRI）交聯(lián)引起的，激活細胞內(nèi)信號通路， 導致脫顆粒和釋放組胺和其他促炎細胞因子。因此，自身免疫條件下的組成型 BTK 激活導 致 FcεRI 的激活。除此之外，免疫細胞如巨噬細胞上的 Fcγ受體（FcγR）也在腫瘤特異性 抗體介導的涉及 BTK 的免疫應答中發(fā)揮重要作用。BTK 還被發(fā)現(xiàn)是 NLRP3 炎性體的直接 調(diào)節(jié)劑。

      Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell 藥靶細胞，通過基因編輯的方式 將 BTK 的 481 位氨基酸半（C）突變?yōu)椤?/span>
 

Figure 1. Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell細胞的構建原理圖

Figure 2. Sanger of  Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell.


2. DdPCR of  Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell

Figure 3. A： BTK WT Parental Cell；B：Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell。通道1 藍色微滴代表BTK C481S 突變陽性，通道2 綠色微滴代表該位點為陰性野生型


3. Anti-proliferation assay

Figure 4. Gene Edited BTK[C481S] Isogenic Cell-CTG 驗證結果.